傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

WEHI 164小鼠纖維肉瘤細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用。可根據(jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Rat compleme factor H (CFH) ELISA Kit 大鼠補體因子H(CFH)ELISA試劑盒

大鼠層粘連蛋白α1(LAMα1)ELISA試劑盒 ，英文名： LAMα1 ELISA Kit

Ratierferon-inducibleprotein10,IP-10ELISAKit 大鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforC-PeptideELISAKit大鼠C肽規(guī)格：48T/96T

細胞樣品細胞氧化酶活性染色試劑盒50次

人皮膚反應因子/炎性因子(SRF/IF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)免疫試劑盒 Mouse Cyclin-D3 ELISA Kit

球菌(SA)檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

Humansecretorycompone,SCELISA試劑盒人分泌成分(SC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

ELISAKitVEGF-C小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C規(guī)格：48T/96T

ELISAKitKGF人角化細胞生長因子規(guī)格：48T/96T

大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒 ，英文名： TpP ELISA Kit

人蛋白激酶A(PKA)ELISA檢測試劑盒HumanProteinkinaseA,PKAELISAKit 96T/48T

大鼠Na-K-ATP酶免疫試劑盒 Rat Na+/K+-ATPase ELISA kit

CLIAKitforSmIg(HumanSurfaceMembraneImmunoglobulin)ELISAKit人細胞膜表面規(guī)格：48T/96T

腫瘤相關表面抗原EBAG9抗體

C單克隆抗體

乳酸脫氫酶抗體

Multimerin 2蛋白抗體

線粒體核糖酶P蛋白3抗體

白細胞介素31抗體

磷酸化Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關蛋白抗體

CDC42結合蛋白激酶α/MRCKα抗體

WEHI 164小鼠纖維肉瘤細胞鴨甲型肝炎病毒聚蛋白/鴨肝炎病毒抗體